Evaluación de la Dúplex PCR para el diagnóstico simultáneo de Mycobacterium spp. y Brucella spp. en bovinos

  1. Escobar, Ariel
  2. Cevallos, Orly
  3. Zambrano Montes, Samir
  4. Morante Carriel, Jaime Alfredo
  5. Carranza Patiño, Mercedes Susana
  6. Nieto, Enrique
  7. Cadme, María
  8. Pinargote Mendoza, Edgar
Revista:
Scientia Agropecuaria

ISSN: 2306-6741 2077-9917

Año de publicación: 2013

Volumen: 4

Número: 1

Páginas: 37-43

Tipo: Artículo

DOI: 10.17268/SCI.AGROPECU.2013.01.04 DIALNET GOOGLE SCHOLAR lock_openDialnet editor

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Resumen

La tuberculosis y la brucelosis siguen siendo causas importantes de morbilidad y mortalidad en muchos países, para la detección de ambas enfermedades se requieren de herramientas eficientes y sensibles para efectivizar el diagnóstico. Este trabajo fue dirigido a evaluar y comparar la técnica de Dúplex PCR frente a la PCR anidada, para la detección de Brucella spp. (BR) y Mycobacterium spp. (TB). Se utilizó un total de 100 muestras de tejidos a partir de nódulos linfáticos traqueo bronquiales, pulmón de bovinos y, aislados bacterianos de TB y BR como controles positivos. Diez combinaciones de iniciadores dirigidos a flanquear un segmento de la secuencia 16S ARNr (BR) y el gen antígeno MPB70 (TB) fueron evaluados, el mejor resultado para la Dúplex PCR se logró con los iniciadores Bru-2F/Bru-2R para BR y para TB, Tub-1F/Tub-N-R. Los productos de amplificación fueron de 225 y 230-pb respectivamente. A fin de potencializar los resultados de la técnica propuesta, todas las muestras fueron inicialmente analizadas y comparadas entre la PCR simple y la PCR anidada (Kappa, k = 0,85) y, la concordancia entre los resultados obtenidos con la PCR anidada y la Dúplex PCR (k = 0,88), para las dos bacterias fue muy buena.