Heterogeneidad intratumoral en la expresión de moléculas mhc en tumor murino gr9mecanismos moleculaes implicados y comportamiento biológico in vivo

Abstract

Uno de los factores que más pueden influir en el fracaso de los tratamientos antitumorales es la amplia heterogeneidad intratumoral. Los tumores se componen de una población muy diversa de células tumorales que exhiben una amplia gama de fenotipos genéticamente heterogéneos. La aparición de estos fenotipos es consecuencia, en parte, de la inmunovigilancia antitumoral ejercida sobre las células tumorales, lo que produce la ¿escultura inmunológica¿ de las lesiones tumorales. El sistema inmune ejerce una presión selectiva contra el tumor eliminando aquellas variantes tumorales más inmunogénicas, mientras que las células tumorales que presentan alteraciones que les permiten escapar del control inmunológico y la destrucción, continúan progresando. Cuál de estos efectos predomina depende del equilibrio entre los mecanismos moleculares de la evasión inmune y la respuesta antitumoral de la inmunidad innata y adaptativa. Las células que escapan, propagan el cáncer a órganos distantes del tumor primario, lo que termina afectando a su función y finalmente pueden llevar a la muerte del paciente. En este trabajo de investigación nos hemos centrado en estudiar la heterogeneidad intratumoral con respecto a la expresión en superficie de moléculas MHC de un tumor murino, GR9. Se ha estudiado cómo se comportan in vivo diferentes clones aislados directamente de un tumor primario y que se diferencian en su fenotipo MHC-I. Se han seleccionado diferentes clones: GR9-A7 con expresión alta de moléculas MHC-I, GR9-B7 con una expresión intermedia, GR9-C5 con una expresión baja y con expresión prácticamente negativa GR9-B11. Realizando ensayos in vivo e in vitro, mostramos que el fenotipo MHC-I de una célula tumoral puede determinar su capacidad oncogénica y metastásica, existiendo relación directa entre los niveles de expresión en superficie de moléculas MHC-I y la capacidad metastásica e indirecta con la oncogenicidad local. Estudiando el diferente comportamiento biológico de estos clones, hemos encontrado unos resultados que nos han permitido profundizar en el papel desempeñado por el sistema inmune en el control metastásico. El clon GR9-B11 no genera metástasis espontáneas en huéspedes inmunocompententes, a pesar de que presenta una alta capacidad oncogénica local. Este dato nos hizo pensar que el sistema inmune podría estar implicado en el control de la diseminación metastásica de este clon. Cuando los mismos ensayos fueron realizados en ratones inmunodeficientes, nude, si se generaron metástasis espontáneas, confirmando una posible implicación del sistema inmune. Ensayos de depleción de diferentes poblaciones celulares del sistema inmune, mostraron que las células metastásicas diseminadas estaban siendo mantenidas en un estado de latencia por el sistema inmune. Solamente la depleción de linfocitos TCD8+ o células NK era suficiente para que las células metastásicas ¿despertaran¿ continuando su progresión hasta generar metástasis pulmonares. Estos resultados demuestran que el sistema inmune es suficiente para controlar la progresión metastásica de células tumorales en nuestro modelo tumoral. También hemos profundizado en los mecanismos moleculares que intervienen en la aparición de fenotipos MHC-I alterados en nuestro modelo tumoral. En células tumorales ha sido ampliamente descrita la aparición de fenotipos MHC-I alterados y existen múltiples mecanismos moleculares implicados en estos defectos. Una de las alteraciones encontradas conlleva la pérdida completa de expresión en superficie de moléculas MHC-I, debido a una baja regulación a nivel transcripcional de varios componentes de la maquinaria de procesamiento antigénica y/o de las cadenas pesadas MHC-I. El mecanismo molecular que produce esta alteración era desconocido. En el modelo tumoral murino GR9, nosotros hemos encontrado que la pérdida de expresión del gen supresor de tumores Fhit es la responsable de esta alteración. Su reexpresión mediante transfección génica promovió la recuperación de la expresión en superficie de las tres moléculas H-2 de clase I en células tumorales.