Desarrollo de nuevos metodos para la sintesis en disolucion de oligosacaridos empleando reactivos soportados y quimicamente etiquetados

Abstract

ÍNDICE INTRODUCCIÓN..................................................................... 1 1.1. ESTRATEGIAS DE GLICOSILACIÓN EN SÍNTESIS DE OLIGOSACÁRIDOS Y GLICOCONJUGADOS ................................3 1.2. ESTRATEGIAS DE PURIFICACIÓN EN SÍNTESIS DE OLIGOSACÁRIDOS Y GLICOCONJUGACDOS ..............................6 1.2.1. Etiquetado previo de los componentes de la reacción ........ 8 1.2.1.1. Etiquetado de los substratos......................................... 8 1.2.1.1.1. Etiquetas químicas insolubles: Síntesis en fase sólida ..........................................................................8 1.2.1.1.2. Etiquetas químicas solubles ............................................ 9 a) Etiquetas poliméricas solubles ................................ 9 1 Etiquetas de oligoetilenglicol ..................................... 9 2 Copolímeros de N-iso-propilacrilamida ......................... 15 2 Polímeros hiperramificados ................................................... 15 b) Etiquetas polifluoradas. Fase fluorada..........................................17 c) Etiquetas lipófilas ........................................................................ 24 d) Ligandos podando de oligoetilenglicol........................................30 e) Etiquetas iónicas ................................................... 32 f) Etiquetas coloreadas .......................................... 35 1.2.1.2. Etiquetado de reactivos y catalizadores .................................. 36 1.2.1.2.1. Etiquetas químicas insolubles: Reactivos y catalizadores soportados ................................................36 1.2.1.2.1.1. Polímeros orgánicos insolubles ............... 37 1.2.1.2.1.2. Soportes sólidos inorgánicos .................. 44 1.2.1.2.2. Etiquetas químicas solubles 52 1.2.2. Etiquetado posterior de los componentes de la reacción .................................................................................... 52 1.2.2.1 Etiquetado de reactivos y subproductos .................................. 52 1.2.2.1.1. Agentes secuestrantes de reactivos y subproductos .........................................52 1.2.2.1.1.1. Etiquetas químicas insolubles .......... 53 1.2.2.1.1.2. Etiquetas químicas solubles ............. 55 1.2.2.1.2. Agentes Capacitadores del Secuestro (Sequestration Enabling Reagents) ................................55 1.2.2.2. Etiquetado de productos: Método de captura y liberación ..................................................................59 1.2.2.2.1. Etiquetas químicas insolubles .................... 60 1.2.2.2.2. Etiquetas químicas solubles ....................... 64 CAPÍTULO I. NUEVOS MÉTODOS PARA LA SÍNTESIS EN DISOLUCIÓN DE AGENTES DADORES DE GLICOSILO EMPLEANDO REACTIVOS SOPORTADOS EN POLÍMEROS INSOLUBLES ........................................................67 2.1. INTRODUCCIÓN ............................................67 2.2. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................. 71 2.2.1. Síntesis de tricloroacetimidatos de glicosilo ................. 71 2.2.2. Síntesis de cloruros y bromuros de glicosilo ..................... 83 CAPÍTULO II. DESARROLLO DE REACTIVOS SOPORTADOS PARA LA ACTIVACIÓN EN DISOLUCIÓN DE HEMIACETALES DE GLICOSILO Y TIOGLICÓSIDOS ................................................95 3.1. INTRODUCCIÓN .........................................95 3.1.1. Activación de hemiacetales de glicosilo .....................95 3.1.2. Activación de tioglicósidos ......................................98 3.2. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ....................................... 104 3.2.1. Síntesis de 1-(4-Hidroxibencenosulfinil)piperidina 38 ............105 3.2.2. Síntesis del 4-(Bencenosulfinil)fenol 41 .....................107 3.2.3. Síntesis de los reactivos soportados en resina de poliestireno mediante una unión de tipo éter ................109 3.2.4. Síntesis de los reactivos etiquetados con cadenas lipófilas ........113 3.2.5. Ensayos preliminares de glicosilación utilizando los nuevos promotores preparados .....................................113 3.2.6. Estudio del efecto del grupo protector del fenol 41 en la reacción de glicosilación empleando modelos solubles ..............117 3.2.7. Síntesis de los reactivos soportados en resina de poliestireno mediante una unión de tipo éster ...............................118 3.2.8. Reacciones de glicosilación de hemiacetales de glicosilo utilizando el sulfóxido soportado 61 .............................123 3.2.9. Reacciones de glicosilación de tioglicósidos utilizando el sulfóxido 61 y la sulfinamida 63 soportados ....................128 CAPÍTULO III. ETIQUETADO LIPÓFILO DE CARBOHIDRATOS .......133 4.1. INTRODUCCIÓN ..............................................................133 4.2. RESULTADOS Y DISCUSIÓN .....................................134 CONCLUSIONES .......................................................................153 PARTE EXPERIMENTAL ....................................................157 6.1. GENERAL ..............................................................157 6.1.1. Disolventes y Reactivos .......................................157 A) Disolventes ...............................................................157 B) Reactivos ...................................................................157 6.1.2. Técnicas y aparatos ...................................................158 A) Procedimientos cromatográficos ............................158 B) Espectroscopia de Resonancia Magnética Nuclear ....................... 158 C) Espectrometría de Masas .............................................................159 D) Puntos de Fusión .................................................................159 E) Análisis Elemental ...................................................................159 F) Espectroscopia Infrarroja con Transformada de Fourier ................ 159 G) Poderes ópticos rotatorios .....................................................160 6.2. Capítulo I ...................................................................160 6.2.1. Síntesis de tricloroacetimidatos de glicosilo .......................160 6.2.2. Síntesis de cloruros y bromuros de glicosilo ...................166 6.3. Capítulo II ....................................................175 6.4. Capítulo III ....................................................226