Susceptibilidad genética a cáncer colorrectal mediada por el receptor 1 del factor de crecmiento transformante beta (tgfbr1)

Resumen

INTRODUCCIÓN: El cáncer colorrectal (CCR) es la segunda causa de muerte por cáncer en población española. La etiología del cáncer colorrectal es una combinación de factores ambientales y genéticos en distintas proporciones. En este trabajo se pretende caracterizar la susceptibilidad genética a CCR esporádico mediada por el gen que codifica para el receptor 1 del factor de crecimiento transformante tipo beta (TGFBR1). MATERIAL Y MÉTODOS: Se analizaron 14 polimorfismos en línea germinal situados en una región de 70kb del locus de TGFBR1, así como los haplotipos generados y la expresión alelo-específica (ASE) del gen como factores de baja penetrancia a CCR utilizando estudios caso-control clásicos y estudios estratificados según sexo, edad, localización y estadio tumoral. La población a estudio está compuesta de 405 individuos diagnosticados de CCR (de los que se excluyeron aquellos con origen hereditario) y 377 controles hospitalarios con patologías no relacionadas con cáncer y en cuya historia personal no se encontraron antecedentes oncológicos. RESULTADOS: El estudio caso-control reveló tres asociaciones significativas entre tres polimorfismos y CCR. En los tres casos, los individuos heterocigotos podrían poseer un incremento de riesgo a CCR (rs7034716 OR:1,420; rs10739778 OR:1,360; rs334365 OR:1,404). En el análisis estratificado se encontraron asociaciones significativas para 6 polimorfismos del locus. En todos los casos, el alelo menos frecuente del polimorfismo parece ejercer un efecto protector frente a la enfermedad en individuos cuya edad es igual o inferior a 67 años (rs7033283 OR:0,523; rs7034462 OR:0,526; rs7034867 OR:0,560; rs12686783 OR:0,576; rs11466445 OR:0,520; rs928180 OR:0,439). El alelo menos frecuente del polimorfismo rs11466445 es más frecuente en aquellos individuos que han sido diagnosticados de tumores en estadios tempranos (OR: 0,473). Ninguno de los haplotipos analizados se asoció a CCR. Sin embargo, en el análisis estratificado se encontraron asociaciones significativas con la edad al diagnóstico y el sexo. En concreto, los individuos portadores del haplotipo H1 cuya edad es igual o inferior a 67 años podrían estar protegidos frente a CCR (OR:0,509). Sin embargo, los individuos mayores de 67 años podrían estar sometidos a un incremento de riesgo frente a CCR si portan el haplotipo H2 (OR:1,669) o protegidos frente a la enfermedad si portan el haplotipo H5 (OR:0,497). Los hombres portadores del haplotipo H4 podrían estar protegidos frente a la enfermedad (OR:0,617). El análisis de ASE se realizó en los individuos heterocigotos para el polimorfismo rs11466445, utilizando muestras de mucosa normal de colon del grupo de pacientes y muestras de sangre periférica del grupo control. La cuantificación relativa se extrapoló a partir de una recta de calibración estándar construida utilizando diluciones seriadas de ADNc de dos individuos homocigotos para cada uno de los alelos. No se encontraron diferencias significativas en los niveles de ASE entre los dos grupos considerando a la expresión alelo-específica como variable continua ni como variable discreta (utilizando como cut-off aquellos niveles de ASE inferiores a 0,78 o superiores a 1,27). Con esta última aproximación, el 25% de las muestras del grupo de pacientes poseía ASE frente al 16,2% de las muestras del grupo control; y en ambos existía una tendencia a sobreexpresar el alelo menos frecuente del polimorfismo (p:0,045). No existe asociación entre ASE y CCR; aunque en el estudio estratificado únicamente se encontró una asociación significativa con la localización tumoral: las muestras procedentes de individuos diagnosticados de tumores en estadios tempranos poseen más ASE que las muestras de individuos diagnosticados de tumores en estadios más avanzados). Para evaluar un efecto tejido dependiente en la expresión alelo-específica se comparó la expresión relativa del gen por PCR cuantitativa a tiempo real en muestras de mucosa normal de colon y sangre periférica del mismo paciente. En nueve de 10 casos, la expresión del gen era superior en las muestras de sangre periférica que en las de mucosa normal de colon. El análisis de ASE reveló 5 muestras positivas. Dos de ellas pertenecen al mismo paciente y sobreexpresaban el alelo más frecuente del polimorfismo, aunque con niveles muy distintos entre ambas. El resto de muestras sobreexpresaban el alelo menos frecuente del polimorfismo, dos procedentes de sangre periférica y una de mucosa normal de colon. Sin embargo, el tamaño muestral limita poder establecer conclusiones acerca de la existencia de expresión alelo-específica tejido dependiente. El análisis de la integridad del ARNm utilizado para el análisis de ASE reveló que se detectaba más expresión alelo-específica en aquellas muestras cuyo ARNm estaba ligeramente degradado (OR: 3,040). Se realizó un análisis combinado de ASE, polimorfismos y haplotipos del locus de TGFBR1 y su asociación con CCR. En concreto, se encontró un riesgo relativo de 5,25 para la combinación de haplotipo H2 y ASE, con un efecto sinérgico de 3,7. La fracción atribuible a esa combinación de casos de cáncer colorrectal de nuestra serie es del 80,95%. CONCLUSIONES: 1). El análisis de susceptibilidad a CCR conferida por los polimorfismos del locus TGFBR1 analizados reveló asociaciones significativas. Algunos de los factores identificados confieren un incremento de riesgo a CCR, mientras que otros ejercen un efecto protector frente a la enfermedad. El efecto de estas asociaciones no es muy acusado. Se trata de asociaciones leves que deben ser validadas en otras series independientes de mayor tamaño muestral. 2). La expresión alelo-específica del gen TGFBR1 es más frecuente en individuos afectos de CCR que en población sana. Sin embargo, este fenómeno no está asociado a un incremento de riesgo a la enfermedad en nuestra población. 3). La combinación de dos factores genéticos del locus TGFBR1 (haplotipo H2 y expresión alelo-específica) confiere un incremento de riesgo a la enfermedad considerable (RR=5.25). La proporción de casos de CCR de nuestra serie atribuibles a dicha combinación es del 80,95%.