Identificación de biomarcadores de quimiorresistencia e invasividad para la mejora del tratamiento del cáncer colorrectal

Abstract

El cáncer colorrectal es un tipo de cáncer muy prevalente en el mundo. La cirugía junto con la quimioterapia como adyuvante han resultado efectivas en fases de I a III. El uso de quimioterápicos puede fracasar debido a fenómenos de quimiorresistencia. Uno de los objetivos de este trabajo fue investigar la respuesta frente al fármaco quimioterapéutico Oxaliplatino. Para ello se utilizó un panel de líneas celulares de cáncer de colon y tumores de pacientes con cáncer colorrectal extirpados en el Hospital Clínico Universitario Virgen de la Arrixaca, a partir de los cuales se realizaron cultivos primarios. Como resultado, dichas líneas celulares y cultivos primarios se clasificaron en sensibles y resistentes. Al estudiar la señalización del daño en el ADN, se descubrió que Chk1 y Chk2, proteínas control de dicha señalización, conseguían activarse por una vía distinta de ATR y ATM, respectivamente. Una de las posibles quinasas activadora de Chk1 podría ser VRK1 y además, la proteína Rad51, implicada en la reparación del daño, se activaría en ausencia de la proteína ATR. En el análisis de mutaciones no se pudo demostrar una asociación entre la presencia de mutaciones en KRAS, BRAF y PIK3CA y la respuesta a Oxaliplatino. La mutación p.R273H en el gen TP53 podría impedir la correcta reparación del daño en el ADN causado por Oxaliplatino, a diferencia de la mutación p.S241F. Otro de los objetivos planteados fue la realización de un análisis diferencial del proteoma de las líneas celulares sensibles y resistentes a Oxaliplatino por 2D-DIGE y comprobar su capacidad de migración e invasividad. Se encontró que la proteína Anexina A2 estaba sobreexpresada en aquellas células con una mayor capacidad invasiva y migratoria y esta proteína se encontraba localizada en la superficie celular. Curiosamente, también se encontró una tinción membranosa en los nidos tumorales que invaden la lámina muscular en cortes histológicos de pacientes y una asociación significativa entre el número de células teñidas con Anexina A2 en la membrana celular y la presencia de tumor budding. Además, se asoció significativamente la presencia de metástasis en los ganglios linfáticos cercanos con el número de células con tinción positiva con Anexina A2 en la membrana celular. Sin embargo, no se encontró relación alguna entre la expresión de Anexina A2 y la capacidad de respuesta a Oxaliplatino. Con estos resultados se ha conseguido encontrar biomarcadores de quimiorresistencia e invasividad que podrían ser utilizados en la terapia individualizada del cáncer colorrectal.