Caracterización morfométrica y neuroquímica de células amacrinas de la retina humana

Resumen

En los últimos años hemos asistido a una gran explosión de conocimientos sobre la retina en diferentes especies de vertebrados, sin embargo la retina que la mayor parte de investigadores intentan conocer, la retina humana, ha sido hasta el momento poco estudiada y la mayor parte de nuestro conocimiento sobre la misma esta basado en estudios sobre retinas de primates. El propósito de este trabajo es introducir una metodología que combinando la caracterización morfológica y el estudio del contenido en diferentes aminoácidos en células previamente seleccionadas, ayude a la identificación de los diversos tipos celulares de la retina humana. Para ello, células amacrinas humanas fueron teñidas con el método de Golgi y clasificadas en base a su morfología, las características de sus arborizaciones dendríticas y su estratificación dentro de la capa plexiforme interna. Tras la caracterización morfológica y la adquisición de diferentes medidas cuantitativas, la población de células seleccionadas fue re-incluida en bloques de Epon 812. A continuación se obtuvieron cortes transversales de 25mm. y sobre las secciones que contenían los cuerpos celulares de las células de interés se realizaron cortes semifinos seriados (0.5 mm) que fueron procesados para detectar inmunoreactividad frente a GABA, glicina, L-glutamato y taurina con anticuerpos marcados con Cy3. Nuestros resultados confirman la diversidad de tipos morfológicos de las células amacrinas humanas y muestran que las células de la retina, una vez caracterizadas con el método de Golgi, pueden ser estudiadas utilizando procedimientos inmunocitoquímicos. Aunque la puesta a punto de la metodología ha supuesto un largo y arduo trabajo, la incorporación de criterios morfométricos y topológicos cuantitativos, unidos a marcadores moleculares y a los parámetros morfológicos clásicamente utilizados para caracterizar las células nerviosas, facilita la discriminación de diferentes tipos neuronales. Esta metodología puede ser útil para la caracterización e identificación de otros tipos celulares en la retina o en otras porciones del sistema nervioso central.