Fosforilación de proteínas en la célula cromafín adrenomedular bovina

Resum

Entre los mecanismos moleculares que pudieran ser responsables del proceso de secreción de catecolaminas acontecido en la célula cromafín adrenomedular, la fosforilación de proteínas aparece como un proceso de importancia. En la tesis en análisis se estudia la relevancia de este mecanismo, utilizando metodología adecuada y tecnología punta en la separación de mezclas complejas de proteínas. El resultado de las experiencias es la caracterización de un conjunto de proteínas que sufren procesos de fosforilación y desfosforilación durante la estimulación de células cultivadas con agentes secretores, centrando la atención en las proteínas que muestran procesos dependientes de calcio, mensajero esencial del proceso secretor de catecolaminas. En otros apartados de la memoria se profundiza en la identificación con técnicas inmunoquímicas de estas proteínas, determinando la fosforilación de proteínas como miosina (cadena ligera), tubulina y enzimas de la biosíntesis de catecolaminas como tirosina hidroxilasa. La caracterización de estas llega hasta la definicion de su ubicación subcelular con técnicas de ultracentrifugación y marcaje inmunocitoquímico. Caracterizadas las proteínas se profundiza en el estudio de las características cinéticas de los procesos de fosforilación y secreción de catecolaminas, así como el tipo de proteínas quinasas responsables de los procesos de fosforilación observados en el sistema biológico estudiado. En los apartados finales se analiza la implicación de algunas proteínas fosforiladas en el mecanismo molecular del proceso secretor observado en células intactas y permeabilizadas con cantidades ínfimas del detergente digitonina. Los aspectos de estructura de la memoria, discusión y cobertura bibliográfica han sido realizados con gran acierto y la presentación y defensa de la memoria con brillantez.