Aplicación de la micropropagación y criopreservación a la conservación ex situ de especies vegetales de interes

Resumen

Los métodos de conservación ex situ surgen a partir de la deficiente aplicación de medidas de conservación de especies en sus hábitats naturales y del hecho de reconocer que tales medidas de conservación in situ no resultan suficientes para luchar contra la galopante reducción de la diversidad biológica. Las herramientas de la biotecnología moderna, concretamente la micropropagación y crioconservación, están siendo cada vez más utilizadas en el apoyo a programas de conservación vegetal ex situ. En este trabajo se desarrolló un protocolo de micropropagación para cada una de las especies vegetales que se detallan a continuación: a) Tamarix boveana Bunge, elemento iberonorteafricano ampliamente distribuido por zonas desérticas del norte de África. En la Península Ibérica se encuentra en poblaciones muy fragmentadas del Sudeste Ibérico y parte oriental hasta el Valle del Ebro. Buena parte de los ejemplares se encuentran en lugares protegidos. Las especies de este género juegan un papel ecológico importante, previniendo la erosión y sirviendo de rompevientos, apareciendo asociados también a corrientes de agua y humedales. b) Helianthemum marminorense Alcaraz, Peinado & Martínez Parras, endemismo sabulícola del Mar Menor (Murcia) y territorios adyacentes del sur de la provincia de Alicante. Ha sido catalogada recientemente como "En Peligro" en la Lista Roja 2008 de la Flora Vascular Amenazada de acuerdo a las categorías de la IUCN. c) Astragalus nitidifiorus Jiménez Munuera & Pau, endemismo exclusivo de la comarca del Campo de Cartagena (Murcia) que se creía extinto hasta 2003. Actualmente esta especie está catalogada como "En Peligro Crítico" de acuerdo con las categorías de la IUCN. Tanto para H.marminorense como para T.boveana se esterilizaron trozos de tallo procedentes de plantas silvestres y se realizó una prueba de medios para determinar cuál era el más adecuado para el establecimiento in vitro, siendo WPM el idóneo para Helianthemum y MS para Tamarix. Para la multiplicación se probaron distintos reguladores del crecimiento, en solitario o combinados y para la elongación y enraizamiento se utilizó un sistema en doble capa en ambos casos. Finalmente se obtuvo un 97 y 85% de plántulas aclimatadas respectivamente. En el caso de A.nitidiflorus la micropropagación se llevó a cabo a partir de semillas. Tras la esterilización y germinación de las mismas se realizó una prueba de medios y se vio que MS era el más adecuado para esta especie. Para la multiplicación se vio que el uso de MS con 0.1 mg l-1 de BA daba buenos resultados en cuanto a número de brotes por explanto y a altura de los mismos. El medio en doble capa se vio que favorecía tanto la elongación como el enraizamiento y la formación de nuevos brotes en el caso de esta especie. Para optimizar el enraizamiento fueron necesarios un medio de inducción y otro de expresión, conteniendo el primero de ellos 0.5 mg l-1 de AIA y el segundo 0.9 g l-1 de carbón activo. Finalmente se obtuvo un 75% de plántulas aclimatadas. Durante el desarrollo del protocolo de micropropagación observamos que tanto Helianthemum marminorense como Tamarix boveana enraizaban de forma espontánea en condiciones in vitro, por lo que decidimos profundizar en el conocimiento de dicho proceso describiendo los cambios temporales que se producen en la concentración endógena de poliaminas a lo largo del mismo. Así vimos que el catabolismo de las poliaminas y los productos derivados de éste parecen jugar un papel importante en el enraizamiento de ambas especies. Además tanto en Helianthemum como en Tamarix la inducción e iniciación de raíces parece ser dependiente de espermina principalmente libre. Además se desarrolló un protocolo de crioconservación mediante la técnica de vitrificación para las especies Tamarix boveana y Astragalus nitidiflorus, obteniendo un 50 y 80% de recuperación post-congelación respectivamente. Asimismo se evaluó la estabilidad genética del material micropropagado y crioconservado de ambas especies mediante la técnica de RAPD, no detectándose variación en ninguno de los materiales analizados.