Aislamiento y caracterización molecular de genes de la superfamilia del TGF-beta que se expresan en el embrión de strongylocentrotus purpuratus

Résumé

Se ha realizado la síntesis eficaz de productos de PCR de más de 5kb, comprobando que la hacen posible la ausencia de potasio y la sustitución de tris por tricina. Se han obtenido varios productos de amplificación mediante PCR a partir de ADNC de s. purpuratus, empleando cebadores diseñados de acuerdo con los segmentos más conservados de algunas de las proteínas más conservadas del TGF-beta. La secuencia nucelotídica de varios de estos productos de PCR corresponde a dos nuevos miembros de la superfamilia a los que hemos denominado SPDVR-1 y SPDVR-2. El análisis de la similitud entre la proteína SPDVR-1 y los restantes miembros de la superfamilia revela que pertenecen al grupo de los DVR, estando muy estrechamente relacionada con las BMP-7, BMP-6 y BMP-5 de vertebrados. Los miembros de la superfamilia más afines a SPDVR-2 parecen ser los genes de las BMP-2 y BMP-4 de vertebrados, así como el de la proteína 60a de drosophila. Los dos genes aislados se expresan en etapas tempranas del ciclo de vida, lo que les convierte en candidatos de participar en el control del desarrollo embrionario.