Optimización de las condiciones de cultivo durante el desarrollo embrionario in vitro en técnicas de reproducción asistida

Resumo

INTRODUCCIÓN El proceso reproductivo es, sin duda, uno de los eventos más complejos, pero al mismo tiempo más fascinantes de la naturaleza, pues representa para cada individuo la posibilidad de perpetuarse a través de sus descendientes. Por ello, la reproducción surge para el hombre como una necesidad y nace, por supuesto, con el hombre mismo (Bavister, 2002; Mendiola et al., 2005). Durante milenios el complejo código genético, innato en todos nosotros, ha evolucionado y pasado de generación en generación, y resulta evidente que ésta es nuestra responsabilidad desde el punto de vista biológico. Según los estudios epidemiológicos más amplios, la esterilidad afecta al 15% de la población en edad reproductiva de los países occidentales, es decir, a una de cada seis parejas y experimenta una evolución creciente, estos datos también revelan que el 85% de las parejas logran espontáneamente una gestación en el transcurso del primer año, y un tercio de estos embarazos ocurre en los tres primeros meses de este periodo. En los doce meses siguientes, conseguirá la gestación espontáneamente un 5% adicional de parejas. Por tanto, y según establece la simple observación, la mayoría de las parejas que no han logrado una gestación tras un año de intentos estarán afectadas por alguna limitación de la capacidad reproductiva (Morice et al., 1995). En consecuencia, la disminución de la fertilidad en edades reproductivas avanzadas o extremas es un hecho fisiológico, por el cual los resultados de los tratamientos con la excepción de la donación de ovocitos sólo podrán aspirar a equipararse a los resultados, traducidos en tasas de fertilidad normales para esta edad, que son notablemente bajos (Lanzendorf et al., 2001; Hwang et al., 2004). Actualmente, en más de la mitad de las pacientes que consultan por esterilidad está presente el factor cronológico, ya que son mujeres que están iniciando su ¿edad reproductiva social¿ cuando ya ha finalizado su edad reproductiva biológica, lo que ha provocado un aumento de la demanda de servicios asistenciales. La hipótesis de trabajo planteada en esta Tesis Doctoral, es la consolidación del cultivo embrionario in vitro, en condiciones dinámicas de oxígeno, con disminución paulatina del mismo. Como base de partida el recientemente incorporado cultivo en hipoxia o a concentraciones reducidas de oxígeno gracias al sistema trigas presente en los incubadores, y que permite acercarnos un poco más a las condiciones fisiológicas de la mujer. Se propuso por tanto un estudio de investigación clínica para evaluar el efecto del oxígeno en el desarrollo embrionario desde el momento de la captación ovocitaria hasta la transferencia embrionaria en día 5, en estadio de blastocisto. Teniendo en cuenta tanto el efecto que produce el oxígeno en los gametos masculinos como femeninos y así establecer la metodología óptima a implementar en el laboratorio de Fecundación in vitro de la clínica IVF Spain, Alicante. Con el fin de aumentar las tasas de éxito en reproducción asistida reduciendo la probabilidad de embarazo múltiple, al poder seleccionar el mejor embrión a transferir. Y por último, en pro de la mejora del cultivo embrionario in vitro y habiendo consolidado las condiciones de oxígeno óptimo en cultivo espermático, ovocitario y embrionario, nos propusimos abarcar todos los posibles factores implicados en el éxito o fracaso del desarrollo embrionario in vitro, y no nos cabe duda de que los medios de cultivo son un factor clave, es por ello que realizamos un estudio prospectivo de cultivo embrionario con dos tipos de medios diferentes, medio secuencial y medio global o cultivo único, manteniendo las mismas condiciones generales de cultivo previamente establecidas. CONCLUSIÓN Por tanto podemos concluir, según nuestro estudio que la mejor concentración de oxígeno para la capacitación espermática in vitro es la hipoxia (5% O2). Mientras que, el desarrollo embrionario in vitro hasta estadio de blastocisto, se ve optimizado en condiciones de cultivo dinámico de oxígeno (10-5% O2), en medio secuencial y con microinyección en condiciones de oxígeno atmosférico.