Evaluación de nuevos métodos de detección, subtipificación y erradicación de Legionella pneumophila

Resumen

La importancia del estudio de esta bacteria radica en sus implicaciones sanitarias, ya que es el agente etiológico de neumonías severas, aunque son también importantes sus implicaciones socioeconómicas, ya que puede afectar a grandes colectividades en forma de brote epidémico, con la consiguiente incidencia sobre diferentes sectores industriales como el turismo, petroquímica, etc. Se hace necesario disponer de métodos de detección de L. Pneumophila rápidos y sensibles. Uno de los objetivos fue la validación de un método molecular de detección basado en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) que permitiera obviar los inconvenientes del método más frecuentemente utilizado en muestras ambientales: aislamiento en medio de cultivo selectivo. Para evaluar el método se realizaron 3 muestreos en un hospital, analizándose un total de 36 muestras del sistema de agua sanitaria tanto frío como caliente de 17 habitaciones. La nested PCR permitió la detección de la bacteria en casos en los que el cultivo resultó negativo o enmascarado, con un nivel de sensibilidad similar al del cultivo (el límite de detección encontrado fue de 10 fg.) y con la ventaja de la rapidez en la obtención de resultados. La presencia de Legionella en el agua residual con diversos de depuración no se ha estudiado en profundidad posiblemente debido a que en este tipo de aguas la microbiota acompañante es tan abundante que prácticamente imposibilita el aislamiento de la bacteria por cultivo. El agua residual constituye un recurso que se está reutilizando cada vez más en la agricultura, en el riego por aspersión de parques y campos de golf, con el consiguiente riesgo para la salud pública. Por ello, se investió L.pneumophila en doce muestras de agua procedentes de una EDAR que recibía aportes tanto urbanos como industriales, sometiendo a las muestras a un método de eliminación de inhibidores de la PCR, consistente en una cromatografía