Tipologia de los aminofosfolipidos y caracteristicas de la enzima acetilcolinesterasa de membranas plasmaticas de plaquetas. Variaciones asociadas al incremento en colesterol

Resumen

En este trabajo se recojen los estudios de composicion fosfolipidica (y sus acidos grasos) de las plaquetas ovinas y sus fracciones subcelulares (membranas plasmaticas (bp), reticulo endoplasmatico y granulos-mitocondrias), la topologia de los aminofosfolipidos (apl) fosfatidiletanolamina y fosfatidilserina (ps) en dichas plaquetas y en vesiculas formadas a partir de sus lipidos, y la localizacion subcelular y propiedades de la acetilcolinesterasa de plaquetas ovinas. Asimismo se describe el efecto del incremento del colesterol sobre dicha topologia y actividad enzimatica. Los apl muestran una distribucion asimetrica, con una disposicion preferente hacia el interior de la bicapa lipidica de las membranas plasmaticas. El incremento en colesterol se asocia a una reorganizacion de los mismos, con una salida significativa de la ps. En el caso de las vesiculas lipidicas, el incremento en esfingomielina tambien favorece este fenomeno. La acetilcolinesterasa se localiza en las fracciones particuladas y en la fraccion soluble de las plaquetas ovinas, presentando en cada caso, diferentes propiedades fisicoquimicas y cineticas. La forma de la fraccion bp tiene el ph optimo mas basico (ph 7,5) y la maxima eficiencia catalitica frente al sustrato cloruro de acetiltiocolina. Las formas asociadas a las membranas muestran dos energias de activacion para la hidrolisis del sustrato anteriormente citado, con un punto de discontinuidad en la representacion de arrhenius entre 17-18 c, que desaparece cuando las membranas plasmaticas se enriquecen con colesterol o se solubilizan con triton x-100. Esto parece indicar una modulacion de la enzima por parte de su entorno. Este enriquecimiento en colesterol hace que varien la termoestabilidad y caracteristicas cineticas de la enzima ligada a las membranas plasmaticas.