Mecanismos de acoplamiento estímulo-respuesta a péptidos hipotalámicos en células de hipófisis anterior

Abstract

EL OBJETIVO GLOBAL DE ESTA TESIS SE HA CENTRADO EN EL ESTUDIO DE LA RESPUESTA ELECTROFISIOLOGICA DE LAS CELULAS GH3 A PEPTIDOS HIPOTALAMICOS UTILIZANDO LA CONFIGURACION DE "PARCHE PERFORADO" DE LA TECNICA DE "PATCH CLAMP". EN CONCRETO, HEMOS ABORDADO LOS EFECTOS QUE LA HORMONA LIBERADORA DE TIROTROPINA (TRH), LA BOMBESINA Y LA SOMATOSTATINA EJERCEN SOBRE LA ACTIVIDAD ELECTRICA DE ESTAS CELULAS. PARA ELLO, HEMOS REALIZADO ESTUDIOS TANTO DE CLAMP DE CORRIENTE (VIENDO LAS VARIACIONES DE POTENCIAL A LO LARGO DEL TIEMPO) COMO DE CLAMP DE VOLTAJE (ESTUDIANDO LAS DIFERENTES CORRIENTES DE ESTAS CELULAS DE FORMA AISLADA). HEMOS COMPROBADO QUE EL USO DEL "PARCHE PERFORADO" MANTIENE INTEGRA LA RESPUESTA ELECTRICA CELULAR A LAS DISTINTAS HORMONAS, LA CUAL ES, AL MENOS EN PARTE, ELIMINADA EN CONDICIONES DE CLAMP DE CELULA ENTERA CONVENCIONAL. UNA PARTE PRIORITARIA DEL TRABAJO SE HA DIRIGIDO A LA CARACTERIZACION DE LOS MECANISMOS QUE CONTROLAN Y MODULAN EL DESARROLLO DE LA DENOMINADA FASE II DE RESPUESTA A LA TRH. ESTA FASE II SE CARACTERIZA POR UN SOSTENIDO Y PROLONGADO INCREMENTO EN LA FRECUENCIA DE LOS POTENCIALES DE ACCION TRAS LA ADICION DE LA HORMONA. HEMOS COMPROBADO QUE LA TRH INHIBE DE FORMA REVERSIBLE UNA CORRIENTE DE CA2+ Y DOS CORRIENTES DE K+, UNA DEPENDIENTE DE CA2+ Y OTRA CON CARACTERISTICAS DE RECTIFICADOR ANOMALO. ASIMISMO, HEMOS COMPROBADO LA PARTICIPACION DE MECANISMOS DE FOSFORILACION Y DESFOSFORILACION EN LA MODULACION DE LA ACCION DE LA HORMONA SOBRE LA ACTIVIDAD ELECTRICA Y SOBRE LA INHIBICION DE LA CORRIENTE RECTIFICADORA ANOMALA. ESTOS RESULTADOS APOYAN LA IDEA DE QUE DICHA CORRIENTE CONSTITUYE UN COMPONENTE CRUCIAL DE REGULACION DE LOS FENOMENOS ELECTRICOS (DESPOLARIZACION DE LA MEMBRANA Y AUMENTO EN LA FRECUENCIA DE LOS POTENCIALES DE ACCION) CARACTERISTICOS DE LA FASE II DE RESPUESTA A LA TRH.