Estudio de las interacciones colesterol-receptor nicotínico de acetilcolina mediante técnicas de marcaje por fotoafinidad

Resumen

El ACCHR es una glicoproteína transmembrana compuesta por 4 tipos de subunidades polipeptídicas diferentes denominadas alpha, presente en dos copias por molécula de receptor beta gamma y delta. Estas subunidades atraviesan la membrana y se encuentran dispuestas alrededor de un poro central, que probablemente constituye el canal iónico. La unión de acetilcolina al receptor produce la apertura de este canal permitiendo el paso de cationes monovalentes a favor de su gradiente electroquímico, generando con ello la despolarización de la membrana postsináptica. En presencia constante de agonista, el ACCHR fluctúa entre dos estados: conductor y no conductor durante varios milisegundos antes de entrar en un estado no conductor conocido como estado desensibilizado que se caracteriza por un aumento de la afinidad del receptor por el agonista. Las técnicas de reconstitución han permitido poner de manifiesto la dependencia de parámetros estructurales y funcionales ACCHR con las propiedades de la matriz lipídica que lo contiene. Uno de los componentes lipídicos con un papel conocido en el mantenimiento funcional del ACCHR es el colesterol. Utilizando distintos sistemas lipídicos, se ha demostrado que la presencia de colesterol constituye un requerimiento esencial para la actividad óptima del canal iónico asociado al receptor, así como para las transiciones entre distintos estados de afinidad inducidas por agonistas. A pesar de la cantidad de información acumulada en relación con este papel del colesterol como modulador de la funcionalidad del ACCHR, poco es lo que se sabe acerca del mecanismo molecular mediante el cual dicha modulación se lleva a cabo. En la presente memoria se han utilizado técnicas de marcaje por fotoafinidad con el fin de comprobar si el mecanismo mediante el cual el colesterol lleva a cabo su efecto modulador es a través de una interacción directa entre el colesterol y el ACCHR. Para realizar el estudio de esta interacción…